粪类圆线虫病二实验诊断方法与形态学

作者：曹兴午韩呈武袁长巍

　粪类圆线虫近期屡屡在 　　作为粪类圆线虫病原学检查的方法，一般在成形或稀便中常可查见丝状蚴，在水样便中主要查见杆状蚴，亦可发现成虫和虫卵[9]。除粪检外，取痰液、支气管灌洗液、十二指肠液对本虫均具有非常高的检出率。对胸腔、腹腔、脑部和心包受累者，可取相应部位的积液检获虫体[9]。另外可采用Baermann法[10]或离心沉淀法及培养法来检查，确认是对本病诊断的关键，但应注意粪类圆线虫幼虫形态相似的有钩虫幼虫、毛圆线虫和福氏类圆线虫的鉴别与区分。

　　2.1粪便直接涂片检查：生理盐水涂片是常用的方法，可在粪便中检出虫卵及活动的杆状蚴和丝状蚴。用牙签挑取约3mg的粪便，涂布在放1~2滴的生理盐水的载玻片上，均匀混合涂开，放盖玻片进行观察。观察时间短和粪便量少，检出率低。浓缩法检出率高[11]。

　　2.1.1虫卵与幼虫形态特点：(1)虫卵：椭圆形，卵壳薄，大小约70×40微米，部分卵内已经含有胚胎。

　　图8人体粪类圆线虫虫卵×40

　　图9鼠猴体内福氏粪类圆线虫(Strongyloidisfuelleborni)粪便中虫卵，。

　　上为低倍多个虫卵;下为高倍单一虫卵(虫卵内含幼虫)[6]。

　　(2)杆状蚴：在温湿度适宜的土壤内数小时即孵化为杆状蚴，大小约0.20～0.45mm，具有双球型咽管图3B,图12。

　　图10粪便中的粪类圆线虫杆状蚴×10[12]

　　图11人粪类圆线虫杆状蚴[12]

　　图12粪便涂片中粪类圆线虫的杆状蚴×[13]

　　A:虫体头部OC(口腔)，EC食道;B：虫体中部GP(箭头所指，生殖原基);C：虫体尾部

　　(3)口腔的局部区别：粪类圆线虫口腔与钩虫口腔的区别，图13。

　　图13杆状蚴口腔：A粪类圆线虫(短);B钩虫(长)[8]

　　图14粪类圆线虫：成熟杆状蚴模式图，箭头为食道[6]

　　图15粪类圆线虫典型杆状蚴食道球模式图(箭头所指)[6]

　　图16,17保存在甲醛液中的人粪便中的杆状蚴.

　　E:杆状蚴的食道;P杆状蚴活动时生殖原基更加清楚[6].

　　(4)丝状蚴：虫体变细长，大小约为0.6～0.7mm,咽管呈柱状，尾端细，具有细小的两叉，为感染性幼虫图4C,图18。

　　图18粪类圆线虫丝状蚴X40[12]

　　图19粪类圆线虫：早期丝状蚴的尾部模式图，被壳包裹(箭头所指)，

　　很快脱落，可见丝状蚴尾部分叉的特征[6]。

　　图20粪类圆线虫丝状蚴尾部(0.9%生理盐水涂片,X0)[12]

　　2.1.2粪类圆线虫幼虫与钩虫幼虫的区分要点这两种寄生虫幼虫酷似，有时候没有经验的很难区分，为了掌握区分要点，例粪类圆线虫与钩虫幼虫形态鉴别表1[7,14]。并就模式图21介绍。

　　2.1.3其它圆虫区分由于幼虫常常形态微小差异，所以必须认真区分，现就粪类圆线虫、钩虫与东方毛圆线虫杆状蚴的区分介绍，图19，

　　图21杆状蚴[8]

　　A:粪类圆线虫;B:钩虫;C:东方毛圆线虫

　　注释：bc,口腔;cs,食道;gp,生殖原基;cb,尾端隆突(球状)

　　图22粪类圆线虫杆状蚴(图底端见生殖原基)[8]

　　图23粪类圆线虫杆状蚴中段(生殖原基放大部位)[8]

　　图24丝状蚴尾部[8]

　　左粪类圆线虫(分叉);右钩虫(尖细)

　　2.1.3依粪便检查时间推论若粪便排出12小时内可能为杆状蚴，超过12小时可能发育为丝状蚴，如果连续24小时排出杆状蚴和丝状蚴，说明患者是自身感染和全身性度感染。一般要与钩虫的幼虫排出时间鉴别，钩虫卵排出体外发育比较缓慢，一般超过24小时(随着温度)或者更长一些，而粪类圆线虫则不然。

　　2.1.4碘染色的方法鉴别生殖原基：采用碘液粪便涂片染色，是区别钩虫与粪类圆线虫的一种方法，碘液可以将幼虫杀死，便于观察，而幼虫的生殖原基清晰易见，观察结构口腔短，生殖原基明显(大)即为粪类圆线虫幼虫;口腔长，看不到生殖原基(小)，则是钩虫幼虫。

　　图25钩虫与粪类圆线虫鉴别模式图[7]

　　2.1.5采用T形滤纸条分离幼虫的方法

　　粪便用常规方法均匀地涂抹在“T”形滤纸上，贴附在盛有凉开水的玻璃试管中。将玻璃试管放入28oC温箱中恒温培养2~5天后，在试管的底部采取“残渣”，放显微镜下观察，先从低倍查找，高倍镜观察，在油镜下测定虫体。测定结果显示，寄生虫体长的2/5处及尾部有细小分叉，为粪类圆线虫丝状蚴。诊断粪类圆线虫病[15]。

待续（三）——分泌物、组织检查与微生物培养分离与检查

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